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                                                          技術文章
                                                          首頁 > 技術中心 > EZBioscience彩色染料法qPCR試劑盒(預混 ROX2型)(A0012-R2)產品介紹

                                                          EZBioscience彩色染料法qPCR試劑盒(預混 ROX2型)(A0012-R2)產品介紹

                                                           更新時間:2024-03-01 點擊量:121

                                                          EZBioscience® 2× Color SYBR Green qPCR 預混液 (ROX2 plus) 使用經過特殊修飾的 Taq DNA 聚合酶,該聚合酶受熱啟動保護活化技術和優化的qPCR緩沖液系統,以進行基于SYBR Green I的實時熒光定量PCR(qPCR)。該混合物補充了惰性紅色染料。以及 EZBioscience® 彩色逆轉錄試劑盒含有惰性藍色染料,以避免移液錯誤。在qPCR反應中將cDNA和其他組分混合在一起,使溶液變成紫色。這在移液時提供了視覺幫助,并降低了反應設置過程中移液錯誤的風險,尤其是在使用白色反應容器時。染料不影響qPCR反應的特異性或靈敏度。該混合物以 2× 的反應濃度制備,可直接用于高模板和低模板 qPCR,具有高靈敏度、特異性和可靠性。

                                                          常見問題及解決方法:

                                                          1. 陰性對照組可觀察到明顯擴增

                                                          原因:使用的試劑或水被污染、引物二聚體的外觀

                                                          解決方法:更換新試劑或水并重試。反應應在超凈臺架上進行,以盡量減少空氣污染、在35個周期后,陰性E對照組出現擴增是正常的可以結合熔融曲線進行分析

                                                          2. ct值出現太晚(大)

                                                          原因:放大效率低、模板的濃度太低、模板退化、擴增子太長、反應中存在PCR抑制劑

                                                          解決方法:優化反應,嘗試三步程序或重新設計引物、增加模板量,同時避免破壞擴增效果、準備新的模板,然后重試、擴增子的長度建議在100bp~200 bp之間、添加模板時通常會引入抑制劑,增加稀釋倍數或準備新模板并重試。

                                                          3. 擴增曲線形狀異常

                                                          原因:擴增曲線粗略、曲線斷裂、曲線突然下降

                                                          解決方法:信號弱而引起的系統整流,升高模板濃度并重復反應、模板的濃度太高,基線的結束值大于Ct值,減少基線的末端(Ct值-4),并重新分析數據、反應管中存在氣泡,當溫度升高時,氣泡破裂,從而儀器檢測到熒光值的突然降低,快速旋轉,仔細檢查反應前是否有氣泡。

                                                          產品選購:

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                                                          A0012-R2

                                                          彩色染料法qPCR試盒(預混 ROX2)

                                                          5ml

                                                           


                                                          国产三级精品久久久久,天堂av888,下载黄色一级我,91啪神ben肥臀女教师歌词